EQUIPO2_6°J_PRACTICA_ACTIVIDAD9

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS No 48

EQUIPO No 2:

Escudero Mendoza Angel Francisco

Fernández Arroyo Andreína

Franyutti Prado Kenia Fernanda

Gallegos Sánchez Gloria

Herrera Martínez Cecilia Montserrat

6º Semestre “J”

BIOQUÍMICA

PROF: Ing. Heriberto Cortés Ojeda

PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRACTICA No

IDENTIFICACION DE LA GLUCOSA EN LA ORINA

OBJETIVO:

Al terminar la práctica, el alumno comprenderá el por qué de la presencia de la glucosa en la orina, además de la técnica para saber identificarla en la misma.

INTRODUCCION:

La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan.

La determinación de glucosa en orina (glucosuria), suele formar parte del análisis de orina rutinario. En condiciones normales, no debería haber glucosa en la orina, pero cuando la cantidad en sangre supera un determinado límite, empieza a ser eliminada a través del riñón con la orina.

La cantidad total de sustancias reductoras encontradas en la orina normal es menor de 0,1%, expresado en glucosa. Esta cantidad está por debajo de la necesaria para dar una reacción positiva con test comúnmente usados en los análisis de orina, cualquier reacción para azúcares justifica una investigación más amplia.

 La glucosa es el azúcar más encontrado en la orina, aunque en ciertas condiciones se pueden hallar otros azúcares como la lactosa, fructosa, galactosa y pentosa.

 La presencia de cantidades detectables de glucosa en orina se conoce como glicosuria o glucosuria. La glucosuria aparece cuando el nivel de glucosa en sangre excede la capacidad de reabsorción de los túbulos renales, cuando el filtrado glomerular contiene más glucosa de la que el túbulo puede reabsorber. La condición puede ser benigna o patológica y el médico puede distinguir entre dos tipos.

 La glicosuria renal aparece con niveles normales de glucosa en sangre, ya que la reabsorción tubular de la glucosa es menor de lo normal permitiendo la aparición de glucosa en la orina. Esta es una condición benigna, como la aparición de glucosuria después de una comida fuerte o por stress emocional.

 La diabetes mellitus, un estado patológico, es la causa principal de la glicosuria. Esta condición está asociada a una elevación marcada de los niveles de azúcar en sangre y normalmente aumenta el volumen urinario. El contenido de azúcar de una orina de una persona diabética es de un 10%, aunque los valores más comúnmente encontrados oscilan entre 2 y 5%. La orina normalmente tiene un color claro con una densidad alta debido al peso de los sólidos disueltos.

Método cualitativo.

Tiras colorimétricas.

La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimétricas. Este test usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidación de D-glucosa a ácido glucónico con formación de  H₂O₂. En presencia de la enzima  peroxidasa, el H₂O₂ generado oxida un cromógeno (orto-dianicidina), produciendo un cambio de color, que indica la presencia de glucosa. Este método es específico para la glucosa y la detecta cuando su concentración está sobre el rango normal.

Métodos cuantitativos.

Método químico: o-toluidina.

La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehído de la glucosa para formar una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de Schiff correspondiente. Las reacciones que tienen lugar después de la condensación original producen una mezcla de cromógenos verdes con una longitud de onda analítica a 630 nm.

MATERIAL:

·               cronómetro

·         10 tubos de ensayo

·           1 gradilla

·           1 pipetas graduadas de 1 mL

·           1  pipeta graduada de 5mL

·           1 pipeta graduada de 2 mL

·           1 peseta

·           1 matraz de aforo de 100 mL

·           1 vaso precipitado de 250 mL

·           1 vaso precipitado de 500 mL

·               termómetro

·               tira colorimétrica

REACTIVOS:

·         glucosa 16 mg/dL

·         o-toluidina

TECNICA:

Tiras colorimétricas.

·         Introduzca una tira de prueba en el tubo que contiene la muestra.

·         Remueva inmediatamente el exceso de muestra de la tira.

·         Espere 10 minutos exactos para el desarrollo del color.

·         Compare el color de la tira con la escala de colores que indica el nivel de glucosa.

·         Descarte cambios de colores después del tiempo indicado.

Método de la o-toluidina

De acuerdo a la tabla 3.1:

·         Prepare una batería de tubos rotulados.

·         Agregue el volumen indicado de la solución estándar de glucosa (16 mg/dL) a los tubos 2S – 6S.

·         Agregue 0,5 ml de las diferentes muestras problemas a los tubos 7MP – 9MP.

·         Complete el volumen de los tubos a 0,5 mL agregando el volumen indicado de agua destilada.

·         Agregue 3,0 mL de la o-toluidina con una pipeta graduada de 5 mL. Tape los tubos con bulbos de vidrio.

·         Homogenice y lleve los tubos a un baño de ebullición por 10 minutos

·         Enfríe y lea la absorbancia a 630 nm. El color es estable por 30 minutos.

TABLA 3.1

TUBO	Glucosa (ml) 16 mg/dL	Glucosa M. P. (mL)	Volumen H2O (mL)	o-toluidina (mL)
1B	0,0	---	0,5	3,0
2S	0,1	---	0,4	3,0
3S	0,2	---	0,3	3,0
4S	0,3	---	0,2	3,0
5S	0,4	---	0,1	3,0
6S	0,5	---	0,0	3,0
7MP	---	0,5 MP1	0,0	3,0
8MP	---	0,5 MP2	0,0	3,0
9MP	---	0,5 MP3	0,0	3,0

De acuerdo a los datos:

·         Calcule la concentración de glucosa en los tubos (2S – 6S).

REPORTE CON ESQUEMA:

CONCLUSIÓN:

CUESTIONARIO:

1.    ¿Por qué es importante la glucosa en el cuerpo humano?

Es la principal fuente de energía para el metabolismo celular

2.    ¿Dónde se almacena la glucosa en el cuerpo humano?

Se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre

3.    ¿Cómo se le conoce a la glucosa existente en la orina?

La presencia de cantidades detectables de glucosa en orina se conoce como glicosuria o glucosuria.

4.    ¿Por qué aparece la glucosuria?

Aparece cuando el nivel de glucosa en sangre excede la capacidad de reabsorción de los túbulos renales, cuando el filtrado glomerular contiene más glucosa de la que el túbulo puede reabsorber. La condición puede ser benigna o patológica y el médico puede distinguir entre dos tipos.

5.    ¿Qué otros carbohidratos se pueden encontrar en la orina?

Lactosa, fructosa, galactosa y pentosa.

BIBLIOGRAFÍA:

 Robert Bohinski, 1991. Bioquímica, 5ª Edición, Addison-Wesley, Iberoamericana.

EQUIPO 2_6°"J"_RESUMEN ACTIVIDAD 2

EQUIPO 2_6°"J"_RESUMEN ACTIVIDAD 2

En los últimos años, ha habido grandes avances en lo que respecta a la comprensión de cómo influyen los carbohidratos en la nutrición y la salud humana. El progreso en las investigaciones científicas ha puesto en relieve las diversas funciones que tienen los carbohidratos en el cuerpo y su importancia para gozar de una buena salud. De hecho, las noticias son tan buenas, que merece la pena estudiarlos con más detenimiento.

Los carbohidratos o hidratos de carbono, son llamados también glúcidos . Son compuestos ternarios formados por tres bioelementos (C,H,O), son de origen vegetal y tienen sabor dulce por eso se encuentran en el grupo de los azucares y sus derivados.

Los hidratos de carbono son importantes para los seres vivos, en especial la glucosa, un azúcar sencillo presente  en los frutos carnosos, en la alimentación su importancia constituye en formar sustancias   de reserva en los animales (glucógeno) y en los vegetales (almidón), su funciones de servir de combustible en los procesos  metabólicos, aunque contienen menos energía que las grasas (1 gramo de glucosa es igual a 4.1 calorías ) .Los mas sencillos se denominan MONOSACARIDOS , o azucares simples (por ejemplo , ribosa , glucosa, galactosa, lactosa , sacarosa ), y los mas complejos reciben el nombre de POLISACARIDOS , o azucares compuestos . Entre estos , los mas abundantes son el glicógeno, el  almidón y la celulosa , que es el material estructural fundamental de todos los organismos vegetales.

Los lípidos llamados también aceites o grasas , son compuestos orgánicos que forman cadenas mas o menos largas, apenas solubles en agua , pero si en solventes orgánicos como el éter ,  benceno , alcohol, etc.

Los lípidos desempeñan un papel importante como reserva de energía en los animales (1 gramo de grasa es igual a 9.3 calorías ). Hay varios tipos : Las Grasas ; están formadas por glicerol y ácidos grasos ,y pueden ser saturadas (característica de los animales ) o no saturadas (propias de los vegetales ). Los Fosfolipidos son lípidos que llevan un grupo fosfato y forman las membranas celulares . Los Esteroides son otro grupo importante ,pues constituyen ,por ejemplo, las hormonas sexuales de los animales. Uno de los fines del siguiente trabajo es  aprender y valorar la importancia de los carbohidratos y lípidos , dos de los principales compuestos que aparecen en los materiales orgánicos de todos los organismos , aquí conoceremos su composición, función e importancia para la vida ,esperando dejar en claro todo lo mencionado, veremos a continuación .

Los carbohidratos, químicamente, son biomoléculas formadas por átomos de carbono (C), hidrógeno (H) y oxígeno (O) en una relación general de 1:2:1. Los átomos de carbono están unidos a grupos alcohólicos o hidroxilos (-OH) y a radicales hidrógenos (-H). En todos los glúcidos siempre hay un grupo carbonilo, es decir, un carbono unido a un oxígeno mediante un doble enlace (C=O), que puede ser un grupo aldehído (-CHO) o un grupo cetónico (-CO-).

Biológicamente, se absorben en el intestino sin necesidad de digestión previa, por lo que son una fuente muy rápida de energía. Los azúcares más complejos (disacáridos y polisacáridos) deben ser transformados en azucares más sencillos (monosacáridos) para ser asimilados.